原因：标准品溶液配置错误、标准品复溶不当、标准品已降解、曲线标度不适合。

解决方法：确认稀释正确、适当保存和处理标准品、尝试不同标度绘制曲线、使用经过校准的移液器。

原因：孵育时间过短、样品中靶标含量低、样品类型不适用、抗原表位无法识别、检测缓冲液相容性问题。

解决方法：增加孵育时间、减小样品稀释倍数或浓缩样品、使用验证过的样品类型作为阳性对照、使用直接或间接ELISA方法增强检测能力、确保检测缓冲液与靶标兼容。

原因：孔中有气泡、洗涤不均、试剂混匀不充分、移液量不一致。

解决方法：读板前确保无气泡、检查洗板机、确保所有试剂充分混匀、使用校准的移液器。

原因：孔洗涤不充分、洗涤缓冲液污染、检测试剂过多、封闭缓冲液无效、抗体非特异性结合。

解决方法：增加洗涤次数、制备新鲜洗涤缓冲液、减少检测试剂用量、尝试不同的封闭剂、使用适当封闭缓冲液。

原因：试剂保存不当、靶标不足、检测试剂失活、测定方法不够灵敏。

解决方法：按推荐方式保存试剂、浓缩样品或降低样品稀释度、确保酶/荧光素具有预期活性、更换更灵敏的检测系统或方法。

解决方法：样本稀释、更换稀释液、优化实验体系。

原因：显色时间不当、底物或酶失活。

解决方法：优化显色时间、确保底物和酶新鲜且未失活。

解决方法：保证血清或血浆标本分离良好，及时放入孵箱，使用吸水纸吸干酶标板表面，严格按照操作步骤进行。

解决方法：降低抗体浓度、稀释样品、缩短孵育时间、优化显色步骤。

解决方法：保持清洁和有序，避免样品或试剂的交叉污染。